一、直接ELISA

原理：將抗原與固相載體連接，洗滌除去未結(jié)合的抗原及雜質(zhì)。加酶標(biāo)抗體進行孵育。固相免疫復(fù)合物上的抗原與酶標(biāo)抗體結(jié)合。徹底洗滌未結(jié)合的酶標(biāo)抗體。此時固相上帶有的酶量與標(biāo)本中受檢抗原的量相關(guān)。加底物反應(yīng)。直接法主要用于測定抗原。

優(yōu)點：操作流程簡短，實驗步驟少；無需使用二抗，避免了交叉反應(yīng)；實驗步驟少，操作不易出錯。

缺點：實驗中的一抗需要直接用酶標(biāo)記，成本相對較高。

二、競爭法ELISA

原理：競爭法ELISA更為復(fù)雜，通常用于檢測小分子如半抗原、激素、藥物等。樣品中待檢游離抗原與固定于固相載體上的抗原一起競爭相同的有限量抗體，當(dāng)樣品中的游離抗原越多，就可結(jié)合越多的抗體，而固相抗原只能結(jié)合較少的抗體。反之亦然。經(jīng)洗滌去除樣品中的抗原與抗體的結(jié)合物，只留下固相抗原與抗體的結(jié)合物。顯示經(jīng)計算可得樣品中抗原的含量。競爭法可根據(jù)實驗設(shè)置直接法、間接法或夾心法形式。