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在實驗室進行細胞培養(yǎng),區(qū)分細胞類型非常重要。常見的細胞培養(yǎng)類型有原代細胞、細胞系這兩種,它們之間有啥區(qū)別呢?如何通過細胞特征來分辨?本文為大家詳細介紹一下細胞系和原代細胞之間的區(qū)別。
定義:原代細胞是直接從活體組織(如皮膚、內臟、血液等)通過酶消化(如胰蛋白酶)或機械分離法獲取的單細胞,首次在體外培養(yǎng)的細胞。
生命周期:原代細胞的分裂能力有限,其可傳代次數(shù)因細胞類型、來源(如供體年齡)和培養(yǎng)條件等因素而異,通常在進入衰老前只能進行數(shù)十次分裂。
定義:細胞系是指原代細胞經首次傳代成功后建立的細胞群體。根據(jù)其增殖潛能,細胞系可分為兩類:
有限細胞系:它們是原代細胞傳代后直接形成的,增殖能力有限,經過一定次數(shù)的分裂后會進入衰老期。
無限細胞系:它們是有限細胞系在培養(yǎng)過程中發(fā)生轉化,或直接來源于腫瘤組織,從而獲得了無限增殖能力的細胞群體,可以被永久傳代培養(yǎng)。
難點:分離技術要求較高(需無菌、快速操作),貼壁率低,存活時間短,需優(yōu)化培養(yǎng)基成分(如添加生長因子)
成本:細胞來源活體,取材成本較高,培養(yǎng)試劑較為昂貴。
優(yōu)勢:標準化培養(yǎng)流程,適合常規(guī)培養(yǎng)基(如DMEM+10%胎牛血清),易于凍存和復蘇。
成本:價格低廉、可大規(guī)模擴增。
原代細胞的適用場景:
藥物研發(fā):更精準預測體內藥效/毒性(如藥物EC50值在細胞系與原代細胞間差異顯著)
個性化醫(yī)療:患者來源的原代細胞(PDCs)用于個體化藥物篩選(如膽管癌對雷公藤紅素的敏感性測試)。
基礎研究:細胞分化、信號通路、代謝研究(如脂代謝模型需原代脂肪細胞)
局限:批次間差異大,實驗可重復性低。
細胞系的適用場景:
高通量篩選:大規(guī)?;蚓庉嫞ㄈ?/font>CRISPR/Cas9文庫篩選)、藥物初篩。
機制研究:過表達/敲除基因的功能驗證(如NG108-15細胞用于神經內分泌研究)
局限:遺傳漂變可能導致結論偏差,體內外結果一致性低。
鑒于原代細胞和細胞系在生物學特性上存在本質區(qū)別,這會直接影響實驗設計的有效性和結果的可靠性。因此,無論是實驗室的新手還是資深研究者,都必須掌握準確辨別并正確處理這兩種細胞的能力,這一點至關重要。